Fram till idag har sju skådespelare spelat James Bond i 24 filmer från filmbolaget Eon Productions. Först ut att spela rollen som agent 007 var dock den amerikanska skådespelaren Barry Nelson som 1954 var med i en TV-adaption av Ian Flemmings novell Casino Royale. Först med att axla rollen som Bond i en filmproduktion var Sean Connery och gjorde så i filmen Dr. No från 1962. Ian Fleming motsatte sig till en början av valet av skådespelare då han ansåg att Connery saknade den finess och elegans som hans karaktär Bond hade. Connerys tolkning av Bond skiljde sig märkvärt från hur Fleming beskrev honom genom att agera mer promiskuös och kallblodad än karaktärens litterära version. Efter att Connery hade spelat Bond i den efterföljande filmen, From Russia with Love, ändrade dock Fleming uppfattning och hade svårt att se någon annan skådespelare i rollen. Connery gestaltade agent 007 i fem filmer på sex år och valde att lämna rollen efter You Only Live Twice från 1967 då trycket och förväntningarna blev för stora.

I följande Bond-film, On Her Majesty’s Secret Service, från 1969 axlade istället den australienske skådespelaren George Lazenby agentrollen. 29 år gammal vid inspelningen är han den yngsta skådespelaren i den rollen och Lazenby är också den enda Bond-skådespelaren som har blivit nominerad till en Golden Globe för sin insats.

Sean Connery gjorde come-back i nästa film, Diamonds Are Forever (1971), då ett lönekuvert på över 250 miljoner kr, i dagens penningvärde, fick honom att komma över trycket från förväntningarna. Till nästa film när Connery återigen avböjt blev Roger Moore nästa skådespelare att ta över rollen. Moore spelade Bond i sju filmer och var 57 år gammal när han spelade in filmen A View to Kill vilket gjorde honom till den äldsta skådespelaren i rollen. Sammanlagt har Moores Bond-filmer dragit in över 1 miljard USD.

Efter att Roger Moore tackade för sig valdes Timothy Dalton till ny agent. Han axlade huvudrollen i två filmer som båda fick ett något ljummet mottagande av publiken och var inte särskilt inkomstbringande. Efter Daltons sista film, License to Kill (1989), dröjde det sex år innan vi fick se en ny Bond-film, då med Pierce Brosnan som James Bond i filmen GoldenEye. Brosnan och GoldenEye fick god kritik men de efterföljande tre Bond-filmerna med Brosnan i huvudrollen var kritikerna splittrade även fast filmerna drog in mycket pengar.

Daniel Craig är den sjätte skådespelaren att gestalta Bond och har gjort så sedan 2005 med Casino Royale som första film i rollen. Många fans och kritiker motsatte sig starkt till att Craig fick rollen men efter filmen haft premiär skiftade rösterna från klagomål till hyllningar. Craig har spelat Bond i hittills fyra filmer och han har fått erbjudande om 150 miljoner USD för att gestalta Bond igen men uppges ha tackat nej. Kommande skådespelare för att ta över rollen ryktas Idris Elba, Tom Hiddleston eller Jamie Bell.